Меню страницы:
1. Что такое мутация BRAF?
Тест на наличие мутации гена BRAF показан больным c метастатической меланомой и распространенным раком легкого для отбора пациентов на терапию низкомолекулярными ингибиторами мутированного белка BRAF.
Меланома считается коварной болезнью, так как она крайне быстротечна, склонна к рецидивам, имеет несколько форм и трудно диагностируется на начальных стадиях. В развитии раковые клетки мутируют. Для разработки курса лечения нужно определиться с типом мутации болезни в конкретном случае. Своевременно подобранные препараты могут спасти жизнь пациента.
BRAF мутация представляет собой важный показатель степени опасности болезни меланомы. В большинстве случаев при развитии меланомы у больных встречаются такие виды мутации, как:
BRAF;
c-Kit;
NRAS.
BRAF мутация встречается в 45―65% случаев. Для проведения корректной таргетированной терапии врачу необходимо понимание о наличии мутации клеток. Это исследование проводится на этапе образования метастазов при недостаточности стандартных методах лечения.
Этот ген отвечает за сигнальный путь в клетке. В здоровом состоянии этот путь неактивен, но при появлении мутации продуцируется активированный белок, вызывающий избыточный перенос к факторам роста. В итоге клетки размножаются в ускоренном темпе, а это уже приводит к неконтролируемому росту раковой опухоли.
2. Частота и виды мутаций в гене BRAF
Частота мутаций в гене BRAF при меланоме кожи, по данным разных исследователей, варьирует от 30-40% до 70%. Наиболее распространенной (69-94% случаев) разновидностью BRAF-мутаций является V600E – замена валина на глутамин в 600-м кодоне. Эта мутация представляется доминирующей, но далеко не единственной разновидностью нарушений BRAF [14, 15]. Второй по частоте является мутация V600К – ее частота может достигать 5-10%. Мутации V600D и V600R встречаются значительно реже.
3. Cтатус мутации гена B-RAF. Выбор тактики терапии
В клиниках Турции в последние годы достигнуты огромные успехи в исследовании патогенетических основ развития меланомы и совершен огромный шаг к обнаружению новых потенциальных молекулярных мишеней.
Открытие молекулярной мишени BRAF и понимание ее роли в патогенезе меланомы легли в основу разработки нового класса препаратов – низкомолекулярных ингибиторов мутированного фермента BRAF.
Использование этих препаратов позволяет блокировать патологически активированный сигнальный каскад, который запускается мутацией BRAF V600, и, таким образом, тормозить развитие опухоли. Следует особо отметить, что воздействие данной группы препаратов на опухолевые клетки с нормальной последовательностью BRAF, напротив, может сопровождаться патологической активацией каскада RAS-RAF-MEK-ERK и провоцировать рост меланомы. Этот феномен свидетельствует об исключительной важности достоверной диагностики статуса гена BRAF.
Следует подчеркнуть, что ингибиторы BRAF и MEK зарегистрированы к применению только для терапии метастатической формы меланомы. В настоящее время отсутствуют данные по использованию ингибиторов BRAF и MEK в адъювантном режиме, поэтому они не могут быть рекомендованы пациентам, перенесшим (условно-)радикальное удаление первичной меланомы и метастических очагов.
В рандомизированных клинических исследованиях ингибиторы BRAF – вемурафениб и дабрафениб – продемонстрировали значительное преимущество по сравнению со стандартной химиотерапией в отношении частоты объективных ответов, продолжительности жизни без прогрессирования и общей продолжительности жизни у пациентов с метастатической меланомой и подтвержденной мутацией гена BRAF, ранее не получавших системного лечения . Полученные результаты привели к пересмотру международных клинических рекомендаций, которые включили эти препараты в современные стандарты лечения метастатической меланомы кожи с BRAF мутацией.
Результаты последних исследований показали, что двойное ингибирование сигнального пути MAРK, которое достигается при одновременном использовании ингибиторов BRAF и MEK, обладает более высокой эффективностью по сравнению с ингибитором BRAF в монорежиме. Важно отметить, что помимо более высокой эффективности комбинация препаратов снижает вероятность развития резистентности к проводимой терапии и отдельных нежелательных явлений, в том числе плоскоклеточного рака кожи. В рамках клинического исследования coBRIM было подтверждено, что комбинированная терапия с использованием препаратов вемурафениб и кобиметиниб в 90% случаев позволяет достичь ответа на терапию у больных BRAF+ метастатической меланомой. У каждого второго пациента более года отсутствовали признаки прогрессирования заболевания, а общая выживаемость приближалась к 2 годам (рис. 3).
Сходные результаты были продемонстрированы в исследованиях дабрафениба и траметиниба. В частности, исследование COMBI-V (дабрафениб+траметиниб vs монотерапия вемурафенибом) продемонстрировало значимой увеличение общей продолжительности жизни у пациентов, получавших комбинированную терапию, по сравнению с применением вемурафениба без ингибитора MEK . В клиническом испытании COMBI-D сравнивалась эффективность комбинации дабрафениб+траметиниб по отношению к монотерапии дабрафенибом в сочетании с плацебо. Примечательно, что в этом исследовании были зарегистрированы практические идентичные показатели общей продолжительности жизни .
Определение статуса гена BRAF является обязательным компонентом выработки тактики лечения всех пациентов с неоперабельной/метастатической меланомой кожи.
4. Мутации гена BRAF у пациентов с немелкоклеточным раком легкого
При отсутствии активирующих мутаций EGFR следующим этапом целесообразно тестирование на определение мутации гена BRAF V600.
Среди пациентов с НМРЛ примерно у 30% наблюдаются мутации, в отношении которых может быть применена различная таргетная терапия. Ежегодно примерно у 36 тысяч человек во всем мире, или у 1-3% пациентов с диагнозом рак легкого, в основном – при аденокарциноме, выявляется BRAF V600 положительный НМРЛ . Пациентам с раком легкого рекомендуется проводить тестирование на биомаркеры, чтобы подобрать подходящую таргетную терапию . Гистологические характеристики НМРЛ при мутации BRAF V600E позволяют предполагать высокую агрессивность опухоли . При BRAF V600E мутантном НМРЛ результаты химиотерапии на основе препаратов платины менее благоприятны.
Сигнальный путь RAS/RAF/MEK/ERK вовлечен в развитие немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) и меланомы, а также в другие виды злокачественных новообразований. Мутации BRAF вызывают конститутивную активацию данного сигнального пути .
5. Требования к качеству отправляемого материала для определения статуса гена BRAF
Случаи с неоперабельной или метастатической меланомой (стадии IIIС-IV) и распространенным немелкоклеточным раком легкого.
Образцы опухолевой ткани должны быть зафиксированы в нейтральном забуференном формалине и залиты в парафин.
Для анализа на наличие мутации необходимо предоставить один парафиновый блок (обязательно!) и соответствующее именно этому блоку диагностическое стекло (желательно!) с окраской гематоксилином-эозином.
Предпочтителен биологический материал с содержанием опухолевых клеток не менее 50% в срезе.
6. Методы определения BRAF мутации
Основными методами проведения молекулярно-генетических исследований являются методы, основанные на проведении полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Наиболее распространенным является секвенирование по методу Сенгера, преимуществом которого является определение всех мутаций в исследуемом экзоне. К недостаткам метода относится возможность получения ложно-негативных результатов в 2-10% случаях из-за примеси нормальных тканей.
Также используется метод аллель-специфической ПЦР в режиме реального времени, преимуществами которого является простота, допустимость присутствия нормальных тканей, возможность выявить мутацию, даже если в образце присутствует до 1% опухолевых клеток. Недостатками является выявление мутаций, предусмотренных только тест-системой.
7. Диагностика
Согласно международным стандартам анализ проводится в обязательном порядке на 3-й и 4-й стадиях рака. В исключительных случаях возможна диагностика на 1-й и 2-й стадии, если врач наблюдает быстрое течение болезни. Для выявления гена BRAF мутации проводятся молекулярные пробы, а точнее тест на V600E и полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Этапы сдачи биопробы:
используется ткань опухоли, взятая у больного хирургическим иссечением для гистологического исследования. Могут использоваться первичные ткани с меланомой на коже и метастазные образования.
материал для анализа отправляется в лабораторию в формалине или сразу же после операции.
лаборант фиксирует на стеклах парафиновые блоки - должна быть четко видна граница между здоровой и больной тканями образца. При невозможности этого условия используют парафиновые блоки с генетическим материалом.
Для обеспечения точности анализа должно быть более 20% злокачественных клеток.
Своевременная диагностики BRAF мутации меланомы стоит пациенту жизни.
8. Важность ранней диагностики
Меланома развивается крайне быстро из обычных родинок, имеющиеся на теле каждого человека. Заболевания развивается на ДНК уровне, поэтому регулярные осмотры кожных покровов крайне важны. При подтверждении заболевания положительный результат анализа гена BRAF сообщает лечащему доктору о необходимости коррекции курса лечения. Если установить диагноз на ранних стадиях, меланома хорошо реагирует на таргетное лечение. Отсутствие в последующих анализах мутации свидетельствует об эффективности выбранного курса лечения.
9. Лечение
После получения сведений о B-RAF гене доктор, моделируя курс терапии, пропишет новейшие лекарственные средства для угнетения активности мутации и увеличения шансов пациента.
Атака на раковые клетки препаратами проводится вне зависимости от их локализации. При этом препарат действует целенаправленно как при стандартной химиотерапии.
Одно из преимуществ данной методики заключается в уменьшении побочных эффектов по сравнению с традиционными методами лечения.
10. Рейтинг лучших клиник, оказывающих услуги по диагностике генетической мутации BRUF
FLORENCE NICHTINGALE, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
ЦЕНТР ФИЗИОТЕРАПИИ И РЕАБИЛИТАЦИИ ROMATEM, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
ANADOLU, ГЕБЗЕ, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
YEDITEPE, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
ACIBADEM, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
MEDIPOL HOSPITAL, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
ÖZEL SAĞLIK HASTANESI, ИЗМИР, ТУРЦИЯ
MEDISTATE, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
MEDIKANA, СТАМБУЛ, АНКАРА, ТУРЦИЯ
KENT HASTANESI ,ИЗМИР,ТУРЦИЯ
LIV HOSPITAL, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
MEMORIAL, СТАМБУЛ/ АНТАЛИЯ, ТУРЦИЯ
MEDIKAL PARK, ИЗМИР, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
AMERIKAN HASTANESI, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
KOÇ UNIVERSITY HOSPITAL, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
HISAR INTERCONTINENTAL HOSPITAL, СТАМБУЛ, ТУРЦИЯ
Comments